對畜禽行業(yè)來說，白血病的爆發(fā)不啻于一場“浩劫”：我國花巨資購入的艾維因品系白羽肉種雞此前本已實現(xiàn)了自繁自養(yǎng)，但因感染禽白血病而完全退出市場，從此完全依賴進(jìn)口；更嚴(yán)重的是，國內(nèi)自繁自養(yǎng)的蛋雞、黃羽肉雞等原種雞群也大批量感染了禽白血病；甚至在發(fā)病高峰期，每年至少有6千萬只商品代蛋雞死亡，涉及國內(nèi)三分之二種雞公司的后代，年損失約45億元。
形勢逆轉(zhuǎn)是從一種被稱為“克星”的新技術(shù)開始的。科技日報記者近日走入河北大午農(nóng)牧集團種禽有限公司雞舍，和總經(jīng)理劉平聊起了這個企業(yè)與禽白血病的“戰(zhàn)斗”過程?！艾F(xiàn)在有了禽白血病診斷和凈化技術(shù)，禽白血病病毒在經(jīng)營的蛋雞原種雞群中實現(xiàn)了徹底凈化，再也不用擔(dān)驚受怕了?！眲⑵介_心地說。
這項由山東農(nóng)業(yè)大學(xué)自主研發(fā)的禽白血病診斷和凈化技術(shù)，現(xiàn)已應(yīng)用于眾多養(yǎng)殖企業(yè)，從源頭切斷了疾病的傳播。目前，該診斷檢測技術(shù)被中國農(nóng)業(yè)大學(xué)、中國農(nóng)科院、農(nóng)業(yè)部獸醫(yī)診斷中心等從事禽白血病研究的高校和科研機構(gòu)采用，通過檢疫切斷白血病傳播的防控模式在我國65%的祖代白羽肉雞和60%的祖代蛋雞中推廣應(yīng)用，取得了巨大的經(jīng)濟社會效益。
找出發(fā)病“元兇”
“美國多年前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了禽白血病，我國的白羽肉雞幾乎都由美國進(jìn)口。當(dāng)時我們就判斷，我國的白羽雞得的病可能就是禽白血病。”山東農(nóng)業(yè)大學(xué)崔治中教授表示。
事實證明，崔治中的推斷是正確的。崔治中團隊在我國白羽肉雞中率先分離鑒定了J亞群禽白血病病毒（以下簡稱J病毒），并找到了有關(guān)基因組上可追溯來源的分子標(biāo)志，證實了該病毒來自美國。這也讓國內(nèi)有關(guān)公司的種禽國際貿(mào)易糾紛談判有了科學(xué)依據(jù)。
經(jīng)過深入研究，團隊還發(fā)現(xiàn)J病毒是我國雞群白血病的主要病因。在發(fā)病嚴(yán)重的年份，我國所有白羽快大型肉雞群普遍發(fā)生J病毒感染，并且約70%市場份額的蛋雞種業(yè)公司被投訴。
針對該病毒的傳播原理，崔治中向記者科普道，橫向傳播，指病毒在人群中不同個體間的傳播，在特定條件下也可直接進(jìn)入血循環(huán)；垂直傳播，指通過胎*或產(chǎn)道，病毒直接由親代傳播給子代的方式，“而禽白血病是由禽白血病病毒（ALV）引起的腫瘤病，以垂直傳播為主，但又能橫向傳播，也就是種雞感染禽白血病后會傳給數(shù)量巨大的商品代雛雞，又能在孵化期時橫向傳播給其他剛出殼的小雞。按照理論，一只曾祖代雞能產(chǎn)出24萬只商品雞，也就是如果一只曾祖代種雞感染，會造成數(shù)萬只商品雞感染，經(jīng)濟損失可想而知?！泵鎸@一重疫病，崔治中和團隊人員憂心忡忡。
為此，崔治中團隊連續(xù)多年收集保存各亞群禽白血病病毒共200余株，建立了系統(tǒng)完善的資源庫，由此也創(chuàng)新性地揭示了我國J病毒的分子演變規(guī)律，“翻出”了禽白血病病毒的“家底”。
堵住病毒“進(jìn)口”
找到元兇，下一步就是控制，但我國的曾祖代或者祖代種雞幾乎都從國外進(jìn)口，如何通過對進(jìn)口種雞進(jìn)行檢測以從源頭上避免帶進(jìn)J病毒？“在當(dāng)時，全世界都沒有針對這個新型病毒的檢測試劑?！贝拗沃懈袊@道。
模擬抗原是*一道難關(guān)，正當(dāng)團隊一籌莫展時，另一種病毒吸引了科研人的視線。“當(dāng)時昆蟲桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)剛剛興起，因為其所表達(dá)的蛋白含量高，且它作為真核表達(dá)系統(tǒng)能更好的模擬抗原?！贝拗沃姓f，通過該病毒表達(dá)系統(tǒng)為載體，很快表達(dá)出了J病毒的抗原蛋白，“緊接著，我們研制出了針對該病毒的單克隆抗體，并利用這一單克隆抗體在熒光顯微鏡下觀察到病毒的存在，建立了可用于檢測J病毒的間接免疫熒光檢測方法?！?/span>
間接免疫熒光檢測方法現(xiàn)在是一種非常常規(guī)的檢測方法，“但當(dāng)時在獸醫(yī)學(xué)的應(yīng)用較少?！眻F隊成員趙鵬對檢測方法過程科普道，我們檢測時在所取樣品中加入針對J病毒的單克隆抗體，而這種抗體只會與J病毒結(jié)合，然后再加入熒光素標(biāo)記物，如果抗體已與病毒結(jié)合，則在專用熒光顯微鏡下就能看到病毒感染部位發(fā)出紅色或綠色的熒光，若沒有結(jié)合就不會看到光亮，由此判定細(xì)胞中是否存在病毒感染。整個過程簡單、易操作。
在實踐中，新的診斷技術(shù)也讓國內(nèi)禽類企業(yè)如虎添翼的同時，保證了雞禽的質(zhì)量。
北京愛拔益加家禽育種有限公司等四家公司此前一直從國外進(jìn)口AA、ROSS品系祖代肉雞種苗，在意識到了禽白血病病毒危害的嚴(yán)重性后，運用間接免疫熒光檢測方法，在堵住禽白血病從國外到國內(nèi)的“進(jìn)口”的同時，這三家公司的種雞群很快就實現(xiàn)了禽白血病“零發(fā)生”。直到現(xiàn)在這些企業(yè)仍然是國內(nèi)種禽行業(yè)的龍頭企業(yè)。
凈化國內(nèi)“土著雞”
禽白血病“進(jìn)口”堵住了。然而之前隨進(jìn)口種雞帶入的該禽白血病病毒，已傳進(jìn)了我國幾乎所有自繁自養(yǎng)的蛋雞和黃羽肉雞等原種雞群。在沒有有效藥物或疫苗情況下，如何在這些“土著”雞群中快速、徹底凈化禽白血病病毒？
考慮到該病毒垂直傳播的特點，研究團隊打算通過對種雞群進(jìn)行檢測后淘汰帶毒病雞的方式進(jìn)行凈化。然而，在家禽的哪個生長階段檢測？取雞體中的什么樣品？這些又成為在研究中必須攻克的“山頭”。
適合我國原種雞場的禽白血病凈化集成規(guī)程此時出現(xiàn)了，解決了上述難題。該方法可在種雞生長的幾個關(guān)鍵期進(jìn)行病毒檢測后，徹底淘汰帶禽白血病病毒的雞。規(guī)程中的檢測樣品包括：在種蛋孵化出殼時，技術(shù)人員采集所有雛雞胎糞；在育雛后期，采集所有雞的血液；在開產(chǎn)初期和留種前，采集所有雞的血液和公雞精液。
“由于種蛋出殼時的雛雞*易感染病毒，病毒可能會橫向感染其他剛出殼的雛雞，想徹底清除病毒樣本必須檢測胎糞?！壁w鵬表示，除此之外，還因為“胎糞檢測結(jié)果不僅可以反映這只雞的感染狀態(tài)，還能盡量減少對雛雞的應(yīng)激。從雞出殼8至10周齡時為育雛期，這個時期需要較高的溫度和營養(yǎng)，要飼養(yǎng)在專門的育雛舍中，應(yīng)激反應(yīng)越小越好?！?/span>
*后，為了防止漏檢，在種雞育雛后期由育雛舍轉(zhuǎn)入育成舍時還要檢測，不把病毒帶入新雞舍，在開產(chǎn)初期和留種前，也就是雞要“生孩子”時再進(jìn)行*后把關(guān)。
打破誤區(qū)，做到“不留死角”
此前國際禽病界和家禽育種公司一直認(rèn)為由于精子的自我校正機制等原因，禽白血病病毒并不感染精子，而公雞和母雞直接接觸才會傳染，認(rèn)為在生產(chǎn)中普遍采用人工授精的方式，不會造成禽白血病的感染?！拔覀冏C明了種公雞可經(jīng)精液將病毒傳染給母雞，并由此垂直傳播至下一代。”趙鵬說。
“在實施禽白血病凈化過程中發(fā)現(xiàn)，用感染禽白血病的公雞精液為正常母雞人工授精后，其后代群體中仍有禽白血病感染現(xiàn)象的發(fā)生?！贝拗沃姓f，由此我們開始懷疑公雞的精液是否也會將禽白血病病毒傳染給母雞？
一系列試驗立刻進(jìn)行，通過給雞胚靜脈接種J病毒，待其孵化后找到感染病毒的公雞，再等它們性成熟后采集精液給母雞做人工授精，*后檢測母雞是否感染，并將該母雞產(chǎn)的蛋孵化小雞，對其進(jìn)行病毒分離，結(jié)果顯示，這種方式孵化出的小雞體內(nèi)也可以檢測出禽白血病病毒。“精液中的成分是很復(fù)雜的，精子只是其中一小部分，精子不感染病毒不代表精液中沒有病毒?！壁w鵬表示，試驗數(shù)據(jù)證實了他們的懷疑是正確的，并進(jìn)一步挖掘出新的“真相”：公雞即使血液中沒有檢測到禽白血病病毒，但精液中卻仍可以檢測到這個病毒。新出爐的對公雞精液實施病毒分離檢測的*佳操作流程在眾多雞禽類企業(yè)試驗后，數(shù)據(jù)顯示雞群的禽白血病感染率進(jìn)一步下降。
“過去國際上一直忽略公雞在禽白血病傳播中的作用，漏檢了很多帶病種公雞，所以西方國家需用7至10年甚至更長的時間才能完成凈化。而運用了新技術(shù)，只需3至5年就能徹底凈化原種雞場內(nèi)的禽白血病毒。”趙鵬表示。
這也讓國內(nèi)原種雞群禽白血病病毒凈化“不留死角”。
形勢逆轉(zhuǎn)是從一種被稱為“克星”的新技術(shù)開始的。科技日報記者近日走入河北大午農(nóng)牧集團種禽有限公司雞舍，和總經(jīng)理劉平聊起了這個企業(yè)與禽白血病的“戰(zhàn)斗”過程?！艾F(xiàn)在有了禽白血病診斷和凈化技術(shù)，禽白血病病毒在經(jīng)營的蛋雞原種雞群中實現(xiàn)了徹底凈化，再也不用擔(dān)驚受怕了?！眲⑵介_心地說。
這項由山東農(nóng)業(yè)大學(xué)自主研發(fā)的禽白血病診斷和凈化技術(shù)，現(xiàn)已應(yīng)用于眾多養(yǎng)殖企業(yè)，從源頭切斷了疾病的傳播。目前，該診斷檢測技術(shù)被中國農(nóng)業(yè)大學(xué)、中國農(nóng)科院、農(nóng)業(yè)部獸醫(yī)診斷中心等從事禽白血病研究的高校和科研機構(gòu)采用，通過檢疫切斷白血病傳播的防控模式在我國65%的祖代白羽肉雞和60%的祖代蛋雞中推廣應(yīng)用，取得了巨大的經(jīng)濟社會效益。
找出發(fā)病“元兇”
“美國多年前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了禽白血病，我國的白羽肉雞幾乎都由美國進(jìn)口。當(dāng)時我們就判斷，我國的白羽雞得的病可能就是禽白血病。”山東農(nóng)業(yè)大學(xué)崔治中教授表示。
事實證明，崔治中的推斷是正確的。崔治中團隊在我國白羽肉雞中率先分離鑒定了J亞群禽白血病病毒（以下簡稱J病毒），并找到了有關(guān)基因組上可追溯來源的分子標(biāo)志，證實了該病毒來自美國。這也讓國內(nèi)有關(guān)公司的種禽國際貿(mào)易糾紛談判有了科學(xué)依據(jù)。
經(jīng)過深入研究，團隊還發(fā)現(xiàn)J病毒是我國雞群白血病的主要病因。在發(fā)病嚴(yán)重的年份，我國所有白羽快大型肉雞群普遍發(fā)生J病毒感染，并且約70%市場份額的蛋雞種業(yè)公司被投訴。
針對該病毒的傳播原理，崔治中向記者科普道，橫向傳播，指病毒在人群中不同個體間的傳播，在特定條件下也可直接進(jìn)入血循環(huán)；垂直傳播，指通過胎*或產(chǎn)道，病毒直接由親代傳播給子代的方式，“而禽白血病是由禽白血病病毒（ALV）引起的腫瘤病，以垂直傳播為主，但又能橫向傳播，也就是種雞感染禽白血病后會傳給數(shù)量巨大的商品代雛雞，又能在孵化期時橫向傳播給其他剛出殼的小雞。按照理論，一只曾祖代雞能產(chǎn)出24萬只商品雞，也就是如果一只曾祖代種雞感染，會造成數(shù)萬只商品雞感染，經(jīng)濟損失可想而知?！泵鎸@一重疫病，崔治中和團隊人員憂心忡忡。
為此，崔治中團隊連續(xù)多年收集保存各亞群禽白血病病毒共200余株，建立了系統(tǒng)完善的資源庫，由此也創(chuàng)新性地揭示了我國J病毒的分子演變規(guī)律，“翻出”了禽白血病病毒的“家底”。
堵住病毒“進(jìn)口”
找到元兇，下一步就是控制，但我國的曾祖代或者祖代種雞幾乎都從國外進(jìn)口，如何通過對進(jìn)口種雞進(jìn)行檢測以從源頭上避免帶進(jìn)J病毒？“在當(dāng)時，全世界都沒有針對這個新型病毒的檢測試劑?！贝拗沃懈袊@道。
模擬抗原是*一道難關(guān)，正當(dāng)團隊一籌莫展時，另一種病毒吸引了科研人的視線。“當(dāng)時昆蟲桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)剛剛興起，因為其所表達(dá)的蛋白含量高，且它作為真核表達(dá)系統(tǒng)能更好的模擬抗原?！贝拗沃姓f，通過該病毒表達(dá)系統(tǒng)為載體，很快表達(dá)出了J病毒的抗原蛋白，“緊接著，我們研制出了針對該病毒的單克隆抗體，并利用這一單克隆抗體在熒光顯微鏡下觀察到病毒的存在，建立了可用于檢測J病毒的間接免疫熒光檢測方法?！?/span>
間接免疫熒光檢測方法現(xiàn)在是一種非常常規(guī)的檢測方法，“但當(dāng)時在獸醫(yī)學(xué)的應(yīng)用較少?！眻F隊成員趙鵬對檢測方法過程科普道，我們檢測時在所取樣品中加入針對J病毒的單克隆抗體，而這種抗體只會與J病毒結(jié)合，然后再加入熒光素標(biāo)記物，如果抗體已與病毒結(jié)合，則在專用熒光顯微鏡下就能看到病毒感染部位發(fā)出紅色或綠色的熒光，若沒有結(jié)合就不會看到光亮，由此判定細(xì)胞中是否存在病毒感染。整個過程簡單、易操作。
在實踐中，新的診斷技術(shù)也讓國內(nèi)禽類企業(yè)如虎添翼的同時，保證了雞禽的質(zhì)量。
北京愛拔益加家禽育種有限公司等四家公司此前一直從國外進(jìn)口AA、ROSS品系祖代肉雞種苗，在意識到了禽白血病病毒危害的嚴(yán)重性后，運用間接免疫熒光檢測方法，在堵住禽白血病從國外到國內(nèi)的“進(jìn)口”的同時，這三家公司的種雞群很快就實現(xiàn)了禽白血病“零發(fā)生”。直到現(xiàn)在這些企業(yè)仍然是國內(nèi)種禽行業(yè)的龍頭企業(yè)。
凈化國內(nèi)“土著雞”
禽白血病“進(jìn)口”堵住了。然而之前隨進(jìn)口種雞帶入的該禽白血病病毒，已傳進(jìn)了我國幾乎所有自繁自養(yǎng)的蛋雞和黃羽肉雞等原種雞群。在沒有有效藥物或疫苗情況下，如何在這些“土著”雞群中快速、徹底凈化禽白血病病毒？
考慮到該病毒垂直傳播的特點，研究團隊打算通過對種雞群進(jìn)行檢測后淘汰帶毒病雞的方式進(jìn)行凈化。然而，在家禽的哪個生長階段檢測？取雞體中的什么樣品？這些又成為在研究中必須攻克的“山頭”。
適合我國原種雞場的禽白血病凈化集成規(guī)程此時出現(xiàn)了，解決了上述難題。該方法可在種雞生長的幾個關(guān)鍵期進(jìn)行病毒檢測后，徹底淘汰帶禽白血病病毒的雞。規(guī)程中的檢測樣品包括：在種蛋孵化出殼時，技術(shù)人員采集所有雛雞胎糞；在育雛后期，采集所有雞的血液；在開產(chǎn)初期和留種前，采集所有雞的血液和公雞精液。
“由于種蛋出殼時的雛雞*易感染病毒，病毒可能會橫向感染其他剛出殼的雛雞，想徹底清除病毒樣本必須檢測胎糞?！壁w鵬表示，除此之外，還因為“胎糞檢測結(jié)果不僅可以反映這只雞的感染狀態(tài)，還能盡量減少對雛雞的應(yīng)激。從雞出殼8至10周齡時為育雛期，這個時期需要較高的溫度和營養(yǎng)，要飼養(yǎng)在專門的育雛舍中，應(yīng)激反應(yīng)越小越好?！?/span>
*后，為了防止漏檢，在種雞育雛后期由育雛舍轉(zhuǎn)入育成舍時還要檢測，不把病毒帶入新雞舍，在開產(chǎn)初期和留種前，也就是雞要“生孩子”時再進(jìn)行*后把關(guān)。
打破誤區(qū)，做到“不留死角”
此前國際禽病界和家禽育種公司一直認(rèn)為由于精子的自我校正機制等原因，禽白血病病毒并不感染精子，而公雞和母雞直接接觸才會傳染，認(rèn)為在生產(chǎn)中普遍采用人工授精的方式，不會造成禽白血病的感染?！拔覀冏C明了種公雞可經(jīng)精液將病毒傳染給母雞，并由此垂直傳播至下一代。”趙鵬說。
“在實施禽白血病凈化過程中發(fā)現(xiàn)，用感染禽白血病的公雞精液為正常母雞人工授精后，其后代群體中仍有禽白血病感染現(xiàn)象的發(fā)生?！贝拗沃姓f，由此我們開始懷疑公雞的精液是否也會將禽白血病病毒傳染給母雞？
一系列試驗立刻進(jìn)行，通過給雞胚靜脈接種J病毒，待其孵化后找到感染病毒的公雞，再等它們性成熟后采集精液給母雞做人工授精，*后檢測母雞是否感染，并將該母雞產(chǎn)的蛋孵化小雞，對其進(jìn)行病毒分離，結(jié)果顯示，這種方式孵化出的小雞體內(nèi)也可以檢測出禽白血病病毒。“精液中的成分是很復(fù)雜的，精子只是其中一小部分，精子不感染病毒不代表精液中沒有病毒?！壁w鵬表示，試驗數(shù)據(jù)證實了他們的懷疑是正確的，并進(jìn)一步挖掘出新的“真相”：公雞即使血液中沒有檢測到禽白血病病毒，但精液中卻仍可以檢測到這個病毒。新出爐的對公雞精液實施病毒分離檢測的*佳操作流程在眾多雞禽類企業(yè)試驗后，數(shù)據(jù)顯示雞群的禽白血病感染率進(jìn)一步下降。
“過去國際上一直忽略公雞在禽白血病傳播中的作用，漏檢了很多帶病種公雞，所以西方國家需用7至10年甚至更長的時間才能完成凈化。而運用了新技術(shù)，只需3至5年就能徹底凈化原種雞場內(nèi)的禽白血病毒。”趙鵬表示。
這也讓國內(nèi)原種雞群禽白血病病毒凈化“不留死角”。
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